Истраживање ефеката фенилетаноидних гликозида Цистанцхе на неалкохолну масну болест јетре на основу мрежне фармакологије и ћелијских експеримената
Oct 29, 2025
Абстрацт
Циљ: Истражити мелиоративне ефекте Цистанцхе фенилетаноидних гликозида на неалкохолну масну болест јетре (НАФЛД).
Методе: Мрежна фармакологија је коришћена за предвиђање потенцијалних механизама Цистанцхе фенилетаноидних гликозида против НАФЛД. Ин витро НАФЛД модел је успостављен индукцијом ХепГ2 ћелија слободним масним киселинама (ФФА). Вијабилност ћелија је процењена помоћу CCK-8 теста; Бојење уљем црвеном О је коришћено за посматрање акумулације липида; нивои триглицерида (ТГ) и укупног холестерола (ТЦ) мерени су коришћењем комплета за анализу; JC-1 бојење је коришћено за процену потенцијала митохондријалне мембране; интрацелуларни нивои РОС су процењени помоћу ДЦФХ-ДА флуоресцентне сонде; апоптоза је откривена коришћењем Хоецхст 33342 бојења; а експресија ТНФ-, ПИ3К, Акт и Бак протеина је мерена Вестерн блот-ом.
Резултати: Идентификовано је десет активних једињења и 77 потенцијалних мета повезаних са анти-НАФЛД ефектима, са кључним циљевима укључујући ТНФ, НФКБ1 и ТЛР4. Једињења су показала добар афинитет везивања за мете, посебно ТНФ. У поређењу са моделном групом, Цистанцхе фенилетаноидни гликозиди значајно су смањили акумулацију липида изазвану ФФА у ХепГ2 ћелијама (П < 0,01), снизили интрацелуларне нивое ТГ, ТЦ и РОС (П < 0,01), обновили потенцијал митохондријалне мембране (смањена експресија митохондријалног протеина < 0,01), смањена експресија митохондријалног протеина < 0,01 0,05), и смањена експресија ТНФ-, ПИ3К и Акт протеина (П < 0,05, П < 0,01).
Закључак: Цистанцхе фенилетаноидни гликозиди испољавају анти-НАФЛД ефекте побољшавајући акумулацију липида изазвану ФФА, митохондријалну дисфункцију, оксидативни стрес и апоптозу у ХепГ2 ћелијама. Ови ефекти могу бити повезани са сигналним путем TNF/PI3K/Акт.
Кључне речи: Цистанцхе фенилетаноидни гликозиди; неалкохолна масна болест јетре (НАФЛД); метаболизам липида; оксидативни стрес;апоптоза; TNF/PI3K/Акт сигнални пут; мрежна фармакологија; ћелијски експеримент
Цистанцхе фенилетаноидни гликозиди
Екстракт Цистанцхе високог садржаја на продају
1. Увод
Неалкохолна масна болест јетре (НАФЛД) је хронична болест јетре коју карактерише стеатоза јетре без прекомерне конзумације алкохола. Преваленција у Кини је достигла 32,9%. Његова патогенеза укључује више механизама, укључујући инсулинску резистенцију, оксидативни стрес и неравнотежу цревне микробиоте. Клинички симптоми укључују умор, нелагодност у пределу јетре и бол у стомаку, ау тешким случајевима може напредовати у неалкохолни стеатохепатитис (НАСХ).
Тренутно су интервенције у начину живота примарни третман за НАФЛД. Иако је ФДА одобрила први лек за НАФЛД, Ресметиром (Рездиффра), 2024. године, он има потенцијалне нежељене ефекте као што су повреда јетре и кардиоваскуларни ризици. Због тога постоји хитна потреба да се пронађу безбедни и ефикасни третмани за НАФЛД.
Традиционална кинеска медицина (ТЦМ), са својим карактеристикама више компоненти, вишеструким циљевима и вишеструким путевима, добро је усклађена са сложеном патогенезом НАФЛД-а и нуди јединствене предности у његовом лечењу.
Цистанцхе десертицолаиЦистанцхе тубулосасу лековите биљке из породице Оробанцхацеае, наведене уСхеннонг Бенцао Јинг. Њихове меснате стабљике, богате љускама, традиционално се користе за тонизирање јетре и бубрега, допуњавање есенције и крви и влажење црева. Примарне активне компоненте - фенилетаноидни гликозиди - имају антиинфламаторна својства, снижавају липиде и хепатопротективна својства. Међутим, још увек недостају систематске студије о њиховим ефектима на НАФЛД.
Ова студија има за циљ да анализира фармаколошку основу и потенцијалне механизме Цистанцхе фенилетаноидних гликозида у лечењу НАФЛД користећи мрежну фармакологију, и да даље истражује њихове механизме кроз ћелијске експерименте, пружајући теоријску основу за развој нових лекова.
2. Материјали
2.1 Мрежни фармаколошки алати
ТЦМСП: хттпс://тцмспв.цом/тцмсп.пхп
ЦНКИ: хттпс://ввв.цнки.нет/
ПубМед: хттпс://пубмед.нцби.нлм.них.гов/
ПубЦхем: хттпс://пубцхем.нцби.нлм.них.гов/
СвиссТаргетПредицтион: хттп://ввв.свисстаргетпредицтион.цх/
НетИнфер: хттп://лммд.ецуст.еду.цн/нетинфер/
СуперПред: хттпс://предицтион.цхарите.де/субпагес/таргет_предицтион.пхп
ГенеЦардс: хттпс://ввв.генецардс.орг/
ДисГеНЕТ: хттп://ввв.дисгенет.орг/
СТРИНГ: хттпс://стринг-дб.орг/
Биоинформатика: хттпс://ввв.биоинформатицс.цом.цн/
УниПрот: хттпс://ввв.унипрот.орг/
РЦСБ ПДБ: хттпс://ввв.рцсб.орг/
Цитосцапе 3.9.1: хттпс://цитосцапе.орг/
Р 4.3.3: хттпс://ввв.р-пројецт.орг/
АутоДоцк Вина 1.5.7: хттпс://вина.сцриппс.еду/
2.2 Ћелијска линија
ХепГ2 ћелије рака људске јетре, купљене од Вухан Процелл Лифе Сциенце & Тецхнологи Цо., Лтд.
2.3 Реагенси и лекови
Цистанцхе фенилетаноидни гликозиди (серија бр.. 201610, чистоћа већа или једнака 80%, који садрже 44,5% ехинакозида и 16,1% вербаскозида), купљени од Хотан Децхен Пхармацеутицал Биотецхнологи Цо., Лтд. Основни раствор припремљен на 6,40 мг/м, филтриран на 6,40 мг/м.
Додатни реагенси укључују:
Фетални говеђи серум (ФБС), ДМЕМ медијум, пеницилин-стрептомицин, комплет за бојење Оил Ред О, БЦА комплет, комплет за детекцију РОС, Хоецхст 33342, БСА-В, натријум олеат, натријум палмитат, комплети за ТГ и ТЦ тест, CCK-8{1} мембрански потенцијал, CCK-8{1} мембрански потенцијал антитела за ТНФ-, ПИ3К п85, Акт, Бак, -актин и секундарна ХРП-коњугована антитела.
2.4 Инструменти
ЦО₂ инкубатор (Форма 371)
Ормарић за биосигурност (ХЕРАСАФЕ КС18)
Читач микроплочица (Мултискан ГО)
Обрнути микроскоп (Никон ТС2-С-СМ)
Водено купатило, центрифуга (Х1750Р), аналитичка вага, хемилуминисцентни систем за снимање (Азуре 600), флуоресцентни микроскоп (Леица ДМи8)
