Изоастилбин инхибира неуронску апоптозу и оксидативни стрес у Арат моделу исхемијско-реперфузијске повреде у мозгу: укљученост СИРТ1/3/6

За више информација е-маилtina.xiang@wecistanche.com

Апстрактан

Позадина.Показало се да има изоастилбин (ИАБ).антиоксидативнои анти-апоптотичке функције. Недавна студија је показала да ИАБ може смањитиоксидативностреса код Алцхајмерове болести. Међутим, остаје непознато да ли је антиоксидативна функција ИАБ-а заштитна и код других болести мозга.
Циљеви.Истражити улоге и основне механизме ИАБ-а у реперфузији оклузије средње церебралне артерије (МЦАО/Р) код пацова.
Материјали и методе.Мужјаци Вистар пацова су насумично подељени у 5 група: лажна група, МЦАО/Р група и 3 МЦАО/Р групе којима је даван ИАБ (20 мг/кг, 40 мг/кг или 80 мг/кг) једном дневно током 3 дана. Величина инфаркта, модификована неуролошка оцена озбиљности (мНСС),оксидативностресамаркери, и маркери неуронске апоптозе су коришћени за испитивање функције ИАБ.
Резултати.У поређењу са МЦАО/Р групом, примена ИАБ је смањила величину инфаркта и мНСС резултате код МЦАО/Р пацова. Изоастилбин је такође смањио ниво малондиалдехида (МДА) и појачао активност каталазе (ЦАТ), супероксид дисмутазе (СОД) и глутатион пероксидазе (ГСХ-ПКС). Третман изоастилбином је ослабио МЦАО/Р-индуковане неуронеапоптозау поређењу са МЦАО/Р групом, на шта указују резултати Кс-дУТП ницк-енд (ТУНЕЛ) и вестерн блот тестова посредованих терминалном деоксинуклеотид трансферазом. Изоастилбин је такође преокренуо МЦАО/Р-индуковану смањење експресије протеина СИРТ1/3/6.
Закључци.Ова запажања сугеришу да ИАБ штити одоксидативнострес и неуронска апоптоза код пацова након повреде церебралне исхемије-реперфузије (И/Р) кроз регулацију СИРТ1/3/6, што указује да би ИАБ могао бити обећавајући терапеутски агенс за церебралну И/Р повреду.
Кључне речи:апоптоза, оксидативни стрес, изоастилбин, фокална церебрална исхемија-реперфузијска повреда

Позадина

Исхемијски и хеморагични мождани удар су међу водећим узроцима инвалидитета и смрти широм света.1,2Исхемијски мождани удар настаје због опструкција крвних судова, чиме се циљни органи излажу ризику од смрти ћелије.3Иако је најефикаснији третман за церебралну исхемију брзо поново успоставити снабдевање крвљу, тромболитичка терапија може повећати величину инфаркта и погоршати исхемијско-реперфузиону (И/Р) повреду у мозгу.1,4 Због тога постоји хитна потреба за развојем нових лекова за лечење церебралне И/Р повреде.

Исхемијско-реперфузиона повреда у мозгу укључује сложену патофизиологију, укључујући појавуоксидативностреса, апоптоза и смањење аденозин трифосфата (АТП), што све може довести до повреде неурона.5 Реактивне врсте кисеоника (РОС) се производе током исхемије, што доводи до неуронскеапоптозаи неуролошка дисфункција.6 Конкретно, НАДПХ оксидазе стварају РОС током И/Р повреде, што узрокујеоксидативностреса. Овај стрес је обележен повећаном пероксидацијом липида, смањеном активношћу каталазе (ЦАТ) и супероксид дисмутазе (СОД) и смањеним нивоом глутатиона (ГСХ).7–11 Високи нивои РОС иоксидативностресаће, заузврат, изазвати ћелијску смрт кроз митохондријски апоптотички пут након церебралне И/Р повреде.12 Транзиционе поре митохондријалне пермеабилности могу се отворити као последица сувишне акумулације РОС, што резултира нижим митохондријалним трансмембранским потенцијалом и повећаном производњом активатора каспазе као што је као цитохром ц, који на крају покреће каскаду каспазе и резултира смрћу ћелије.12 Генг ет ал. предложио да је апоптоза неуронских ћелија барем делимично посредована путем митохондријалне апоптозе код церебралне И/Р повреде.13 Последично, инхибиција или преокрет оксидативног стреса и неуронске апоптозе обећавају нове методе за ублажавање церебралне И/Р повреде.

Да бисмо истражили механизам кроз који ИАБ ублажава оштећења изазвана И/Р, фокусирали смо се на СИРТ сигналну каскаду. Недавне студије су показале заштитну улогу СИРТ1/3/6 у различитим болестима, укључујући неуралну дегенерацију у мозгу, упалу крвних судова и накупљање масти у телу. Заиста, открили смо да ИАБ третман повећава ниво експресије СИРТ током И/Р повреде, што указује да ИАБ може заштитити од ћелијаапоптозаповећањем СИРТ експресије. Узети заједно, наши резултати сугеришу да је ИАБ потенцијално користан третман за клиничку церебралну И/Р повреду.

Циљеви

Наш општи циљ је био да испитамо ефекте и основне механизме ИАБ код И/Р повреде користећи МЦАО/Р животињски модел.

материјали и методе

Животиње

Мужјаци Вистар пацова су набављени од компаније Схангхаи Лаборатори Анимал Цомпани (Шангај, Кина). Пацови старости 60–90 дана са нормалном телесном тежином (200–250 г) храњени су ад либитум храном и водом и одржавани су у доследном окружењу (25 ±2 степена, 40 ±10 процената релативне влажности и 12 х светло/тамни циклус) . Са животињама је руковано у складу са смерницама за негу и употребу лабораторијских животиња Јиамуси Цоллеге, Хеилонгјианг Универзитет традиционалне кинеске медицине, Кина. Институционални комитет за негу и употребу животиња са Јиамуси колеџа, Универзитета кинеске медицине Хеилонгјианг одобрио је поступке на животињама (одобрење бр. 20190815).

Успостављање МЦАО/Р повреде и ИАБ третман

Токсичност ИАБ је одређена као што је претходно описано.15 Изоастилбин (Цхенгду Пурецхем-Стандард Цо., Лтд., Ченгду, Кина) је разблажен до коначне концентрације од 20 мг/кг, 40 мг/кг и 80 мг/кг у фосфату. -пуферисани раствор (ПБС). Животиње су рандомизиране у 5 група: 1. лажне; 2. МЦАО/Р; 3. МЦАО/Р праћено 20 мг/кг ИАБ; 4. МЦАО/Р праћено 40 мг/кг ИАБ; и 5. МЦАО/Р праћено 80 мг/кг ИАБ.

Пацови су анестезирани коришћењем интраперитонеалне (ип.) ињекције 50 мг/кг натријум пентобарбитала (Синопхарм Цхемицал Реагент, Пекинг, Кина). Да бисмо увели МЦАО/Р, изложили смо каротидне артерије, односно спољашњу каротидну артерију (ЕЦА), десну заједничку каротидну артерију (ЦЦА) и унутрашњу каротидну артерију (ИЦА). ЕЦА и ЦЦА су проксимално везане. ИЦА је лигирана коришћењем монофиламентног шава од 0,285 мм, уметнутог у лумен ИЦА на око 18 мм кроз ЕЦА пањ да би се опструирала средња церебрална артерија (МЦА). А ЛасерДоплер (УСЦН КИТ ИНЦ., Вухан, Кина) је коришћен да се потврди да је проток крви смањен на мање од 20 процената нормалног нивоа. Лажна група је подвргнута истој операцији; међутим, артерије нису биле везане. После 2 х оклузије, везане артерије су реперфузоване и пацовима је затим даван ИАБ (20 мг/кг, 40 мг/кг или 80 мг/кг) или ПБС дневно током 3 узастопна дана. На крају, 72 х након МЦАО/Р, процењен је неуролошки капацитет пацова.

Процена запремине инфаркта мозга пацова

Након ИАБ третмана, мозгови су брзо измерени да би се измерила њихова мокра тежина. Након тога, мозгови су дехидрирани на 100 степени током 24 сата да би се проценила њихова сува тежина. Концентрација воде у мозгу израчуната је као: ((влажна тежина ‒ сува тежина)/мокра тежина) × 100 процената.

Модификовани скор неуролошке тежине (мНСС)

Сензорне, моторичке, равнотежне и рефлексне неуролошке функције су процењене 72 х након операције МЦАО помоћу мНСС.17 Озбиљност неуролошких дефицита је рангирана на скали од 0 до 10, са вишим резултатом који указује на теже оштећење нервни систем.

Мерење супероксид дисмутазе (СОД), малондиалдехида (МДА), каталазе (ЦАТ) и глутатион пероксидазе (ГСХ-ПКС)

Након ИАБ третмана, садржај протеина је одређен из можданог ткива. Концентрација протеина кортикалних хомогената је одређена коришћењем БЦА комплета (Беиотиме, Шангај, Кина). СОД, МДА, ЦАТ и ГСХ-ПКС су детектовани коришћењем одговарајућих комплета (каталошки бр. А003-1, А001-3, А007 и А005; Нањинг Јианцхенг Биоенгинееринг Институте, Нањинг, Кина). Укратко, сакупљен је супернатант кортикалног хомогената. За СОД, узорци су инкубирани са ВСТ-8/радним раствором ензима на 37 степени током 30 минута. Апсорпција је мерена на таласној дужини од 450 нм. Једна јединица ензимске активности СОД (У) је дефинисана као количина узорка потребна за постизање стопе инхибиције од 50 процената ВСТ-8 формазан боје. За МДА, узорци су помешани са радним раствором, а затим загревани на 100 степени 15 мин. Апсорпција супернатанта је мерена на таласној дужини од 532 нм. За ЦАТ, узорци су помешани са ЦАТ пуфером за детекцију и раствором водоник пероксида, а затим инкубирани на 25 степени током 5 минута. Апсорпција је детектована на таласној дужини од 520 нм. За ГСХ-ПКС, узорци су мешани са ГСХ на 37 степени током 5 минута. Апсорпција супернатанта је мерена на таласној дужини од 412 нм. Једна јединица (У) ензимске активности је дефинисана као количина ГСХ-ПКС у 1 мг протеина која је катализовала потрошњу 1 μмол/Л ГСХ уз одузимање ефекта неензимске реакције.

Терминално бојење деоксинуклеотидил трансферазе дУТП ницк енд лабелинг (ТУНЕЛ)

Ткива мозга ипсилатералне хемисфере су изолована, фиксирана у 4 процента параформалдехида и уграђена у парафин. Ткива су затим исечена на кришке од 5- μм и изложена антигену након 10 минута микроталасног загревања у цитратном пуферу. Неуронска апоптоза је процењена коришћењем ТУНЕЛ теста (Ин Ситу Целл Деатх Детецтион Кит; Роцхе, Пензберг, Немачка), према упутствима произвођача. Укратко, кришке мозга су стављене у ледено хладан 4 процентни параформалдехид на 30 минута, а затим су инкубиране у мраку са ТУНЕЛ реакционом смешом на 37 степени током 1 х. Након тога, језгра су обојена 6-диамидино-2-фенилиндолом (ДАПИ; Сигма-Алдрицх). Узорци су снимљени и индекс апоптозе је израчунат као број ТУНЕЛ-позитивних ћелија подељен са укупним бројем ћелија.

Вестерн блот

Ткива мозга пацова су лизирана коришћењем пуфера радио-имунопреципитационог теста (РИПА) (Беиотиме, Далиан, Кина). Протеини су подвргнути електрофорези на 12–15 процената натријум додецил сулфат-полиакриламидног гела (СДС-ПАГЕ), а затим пребачени на мембране од поливинилиден флуорида (ПВДФ) (Миллипоре, Биллерица, САД). Мембране су блокиране коришћењем млека без масти од 5 процената и инкубиране су са примарним антителима на 4 степена преко ноћи. Секундарна антитела коњугована са пероксидазом хрена (ХРП) су затим инкубирана на собној температури 2 х. Специфични сигнали обележених протеина детектовани су коришћењем хемилуминисцентног система. -актин је коришћен за нормализацију нивоа експресије протеина Бцл-2, Бака и Сиртуина (СИРТ1/3/6). Слике су анализиране коришћењем софтвера ИмагеЈ.

статистичке анализе

Подаци су представљени као средња вредност ± стандардна девијација (СД) из 3 независна експеримента. Потврђено је да подаци из сваке групе прате нормалну дистрибуцију користећи Схапиро-Вилков тест. Разлике између група су анализиране коришћењем једносмерне анализе варијансе (АНОВА), након чега је уследио Тукеи-ев пост хоц тест коришћењем софтвера Присм в. 8 (ГрапхПад Софтваре, Сан Дијего, САД). Вредност п< 0.05 indicated="" statistical="" significance.="" a post="" hoc="" power="" analysis="" was="" performed="" using="" g*power="" 3.1.9.7="" software="" (heinrich="" heine="" university,="" düsseldorf,="">

Резултати

Изоастилбин штити неуроне од МЦАО/Р-индукованих повреда

Да би се истражило да ли су ИАБ заштићени неурони подвргнути церебралном И/Р, анализирана је концентрација воде у мозгу и запремина инфаркта. Код контролних животиња није било инфаркта и концентрација воде је била релативно ниска (слика 1Б,Ц; лажна група). После операције МЦАО/Р, приметили смо значајно повећање величине инфаркта и концентрације воде (Слика 1Б, Ц). Инфаркт и исхемијски едем указују на то да је наш приступ успешно генерисао И/Р модел код пацова. Интересантно, када смо применили различите концентрације ИАБ (20 мг/кг, 40 мг/кг и 80 мг/кг) непосредно након повреде, приметили смо опоравак инфаркта и исхемијског церебралног едема у зависности од дозе (Слика 1Б,Ц). Овај резултат сугерише да ИАБ штити од оштећења мозга изазваног исхемијом. Затим смо прегледали ћелијуапоптозакористећи мНСС тест. Као што је приказано на слици 1Д, лажно оперисани пацови нису показали очигледне неуролошке дефиците, док су МЦАО/Р пацови показали значајно повећане мНСС резултате. У складу са морфолошким променама приказаним на сл. 1Б и сл. 1Ц, ИАБ третман је значајно смањио мНСС скор МЦАО/Р пацова (слика 1Д). Узети заједно, ови резултати пружају доказ да ИАБ има неуропротективну функцију у Виво моделу глодара церебралне И/Р повреде. С обзиром да је већа концентрација ИАБ имала боље заштитне ефекте без очигледних нежељених ефеката, користили смо 80 мг/кг за следеће експерименте.

Изоастилбин ублажава оксидативни стрес код МЦАО/Р пацова

За процену утицаја ИАБ наоксидативни стрес, нивои ГХС-ПКС, МДА, СОД и ЦАТ су процењени након ИАБ третмана. Због повећања оксидативног стреса, пацови подвргнути МЦАО/Р имали су више нивое МДА у поређењу са лажним пацовима. Овај ефекат је ослабљен ИАБ третманом (слика 2А). Штавише, нивои ЦАТ, СОД и ГХС-ПКС смањени су код МЦАО/Р пацова у поређењу са лажним пацовима (Слика 2Б, Д). Третман са ИАБ је повећао нивое ЦАТ, СОД и ГХС-ПКС код МЦАО/Р пацова (слика 2Б, Д), што сугерише да је ИАБ заштитио од церебралне И/Р повреде ублажавањем оксидативног стреса.

Изоастилбин инхибира апоптозу неурона код МЦАО/Р пацова

Затим смо користили ТУНЕЛ тест за процену неуронаапоптозапосле церебралне И/Р повреде. Као што је приказано на слици 3А, постојао је повећан број ТУНЕЛ-позитивних ћелија код МЦАО/Р пацова, који је смањен ИАБ третманом (слика 3А). Да бисмо истражили основне механизме заштите ИАБ-а, испитали смо експресију протеина апоптозе Бак и Бцл-2 коришћењем Вестерн блота. Код пацова који су подвргнути МЦАО/Р, експресија Бак (про-апоптотички маркер) је повећана, док је Бцл-2 (анти-апоптотички маркер) смањена, у поређењу са лажном групом (Слика 3Б, Ц ). Међутим, ИАБ третман је спречио промене изазване МЦАО/Р (Слика 3Б, Ц). Ови резултати сугеришу да је ИАБ инхибирао апоптозу неурона код МЦАО/Р пацова.

Изоастилбин појачава СИРТ експресију

Затим смо покушали да испитамо како ИАБ штити неуроне одоксидативни стрес. Утврђено је да је СИРТ, НАД плус-зависна деацетилаза углавном локализована у митохондријима, повезана са преживљавањем ћелија и апоптозом, ћелијским метаболизмом и одговором на стрес. СИРТ може активирати митохондријалне сигнале и путеве да промовише пролиферацију митохондрија и стварање АТП-а. Такође учествује у запаљењу, на начин да смањење СИРТ-а доводи до повећања фактора хроничне упале, као што су НФκБ и РелА/п65 активност.18–20 Интересантно, неколико студија је открило да СИРТ испољава нервни заштитни ефекат и ублажава оксидативне стрес у патофизиологији церебралне И/Р повреде.21 Овде смо истраживали мождану експресију СИРТ1/3/6 код пацова подвргнутих МЦАО/Р. Открили смо да је повреда МЦАО/Р смањила нивое протеина СИРТ1/3/6, док је ИАБ третман умањио ове ефекте (сл. 4А-Д). Ови подаци сугеришу да би ИАБ могао бити протективан код МЦАО/Р пацова тако што повећава експресију СИРТ1/3/6 у заштити од оксидативног стреса.

Дискусија

Концентрација РОС расте до максимума, што потенцијално може изазвати апоптозу или ћелијску некрозу.25–28 Постоји неколико добро утврђених маркера оксидативног стреса. На пример, МДА, цитотоксично једињење произведено пероксидацијом липида,29 се повећава у кардиомиоцитима пацова након И/Р оштећења.30 Антиоксидативни ензими СОД, ЦАТ и ГХС-ПКС играју важну улогу у уклањању супероксида и спречавању оксидативног оштећења.31, 32 Штавише, промене у активности ових ензима су такође повезане са оксидативним стресом. Смањење оксидативног стреса је потенцијални начин заштите ткива од И/Р повреда.

Недавна студија је показала да неуропротективни ефекат ИАБ-а може бити последица модулације оксидативног стреса. Конкретно, студија је открила да је ИАБ инхибирао генерисање РОС-а и индуковао СОД и ГСХ-ПКС да побољшају оксидативно оштећење у моделу АД миша.15 Међутим, да ли и како ИАБ штити од И/Р повреде у мозгу, још није познато. У овој студији, показали смо да ИАБ успешно ублажава церебралну И/Р повреду смањењем запремине инфаркта и неуролошких дефицита након МЦАО/Р повреде. Да бисмо тестирали да ли су ефекти ИАБ-а последица слабљења РОС врста, измерили смо неколико маркера оксидативног стреса. Утврђено је да третман изоастилбином након МЦАО/Р смањује нивое МДА, али повећава активност ЦАТ, СОД и ГСХ-ПКС. Ови резултати сугеришу да је основни механизам неуропротекције посредоване ИАБ-ом од И/Р повреде кроз смањење оксидативног стреса.

Заиста, церебрални И/Р је у стању да индукује апоптозу неурона.33,34 Активација про-апоптотичких протеина (Бак и Бак) и паралелна инактивација анти-апоптотичких протеина (као што је Бцл-2) десила се током церебралне И/Р повреда. И Бцл-2 и Бак се налазе у спољашњем делу митохондријалне мембране и учествују у модулацији ћелијске апоптозе.35–37 Претходне студије су показале да прекомерна експресија Бцл-2 блокира смрт неурона ин витро и ин виво.38Ерфани ет ал. открили да је однос Бак/Бцл-2 повећан током церебралне И/Р повреде, што је допринело апоптози неурона.39 Штавише, појачана регулација Бак-а и смањење Бцл{12}} пронађене су у мозговима мишева који су били подвргнути МЦАО/Р. 40 Поред тога, откривено је да ИАБ модулира нивое експресије протеина и Бцл-2 и Бак како би побољшао редокс систем код мишева са АД, што указује на анти-апоптотичку улогу ИАБ у овом стању.15 У овом тренутку студији, показали смо да примена ИАБ смањује И/Р-индуковану неуронску апоптозу ин виво тако што смањује Бак и повећава Бцл-2. Ови налази имплицирају да неуропротективна способност ИАБ-а зависи од његове анти-апоптотичке активности код пацова. Међутим, И/Р такође може довести до некрозе, која није посредована оксидативним стресом.25–28 Од великог је интереса испитати да ли ИАБ такође може функционисати инхибирањем некрозе како би се ублажила повреда И/Р.

Да бисмо испитали механизам кроз који ИАБ ублажава оксидативни стрес, фокусирали смо се на СИРТ протеине. Претходни извештај је открио да прекомерна експресија СИРТ3 инхибира фисију митохондрија да би се заштитила од церебралне И/Р повреде. Штавише, СИРТ6 може заштитити мозак од И/Р оштећења кроз супресију оксидативног стреса.2 Овде смо открили да СИРТ1/3/ 6 је значајно смањена код МЦАО/Р пацова, док је примена ИАБ повећала експресију СИРТ1/3/6. Колико нам је познато, ова студија је прва која показује да ИАБ може повећати експресију протеина СИРТ1/3/6 да би ублажио оксидативни стрес и неуронску апоптозу изазвану церебралном И/Р повредом.

Ограничења

Постоји много различитих заштитних путева против оксидативног стреса. Овде смо показали да је сигнални механизам ИАБ заштите преко СИРТ 1/3/6. Међутим, треба даље разјаснити друге механизме против оксидативног стреса или церебралне И/Р повреде. Током И/Р повреде, укључене су и апоптоза и некроза; међутим, фокусирали смо се само на апоптозу. Стога ће бити неопходна даља истраживања о улози ИАБ у некрози да би се у потпуности објаснила заштитна функција ИАБ током И/Р повреде.

Закључци

Овде смо показали да ИАБ може ублажити оксидативни стрес и апоптозу неурона код пацова подвргнутих церебралном И/Р. Штавише, антиоксидативни стрес и анти-апоптотичке функције ИАБ-а могу настати кроз регулацију експресије СИРТ1/3/6. Узети заједно, наши подаци сугеришу да је ИАБ кандидат за лечење церебралне И/Р повреде.

ОРЦИД иДс Лифенг Ан  хттпс://орцид.орг/0000-0002-4835-1817 Дандан Зху  хттпс://орцид.орг/0000-0001-9119-9956 Ксин Зханг  хттпс://орцид.орг/0000-0002-9496-1691 Јингвен Хуанг  хттпс://орцид.орг/0000-0001-6449-5362 Гуангбао Лу хттпс://орцид.орг/0000-0002-2465-8996

Лифенг Ан1,B,D, Дандан Зху2,B, Ксин Зханг2,C, Јингвен Хуанг1,C, Гуангбао Лу1,A,F

1 Јиамуси Цоллеге, Универзитет кинеске медицине Хеилонгјианг, Кина

2 Дипломска школа, Универзитет кинеске медицине Хеилонгјианг, Јиамуси, Кина

А – концепт и дизајн истраживања; Б – прикупљање и/или прикупљање података; Ц – анализа и интерпретација података;

Д – писање чланка; Е – критичка ревизија чланка; Ф – коначно одобрење чланка

Референце

1. Росси ДЈ, Бради ЈД, Мохр Ц. Метаболизам астроцита и сигнализација током исхемије мозга. Нат Неуросци. 2007;10(11):1377–1386. дои:10.1038/нн2004
2. Рибеиро ПВ, Цола ПЦ, Гатто АР, ет ал. Однос између дисфагије, резултата на скали Националног института за здравље можданог удара и предиктора пнеумоније након исхемијског можданог удара. Ј Строке Церебровасц Дис. 2015; 24(9):2088–2094. дои:10.1016/ј.јстрокецеребровасдис.2015.05.009
3. Ху Кс, Де Силва ТМ, Цхен Ј, Фараци ФМ. Церебрална васкуларна болест и неуроваскуларна повреда у исхемијском можданом удару. Цирц Рес. 2017;120(3):449–471. дои:10.1161/цицресаха.116.308427
4. Табассум Р, Ваибхав К, Схривастава П, ет ал. Перилил алкохол побољшава функционалне и хистолошке исходе против исхемијске-реперфузијске повреде слабљењем оксидативног стреса и потискивањем ЦОКС-2, НОС-2 и НФ-κБ код пацова са оклузијом средње церебралне артерије. Еур Ј Пхармацол. 2015;747:190–199. дои:10.1016/ј.ејпхар.2014.09.015
5. Воодруфф ТМ, Тхундиил Ј, Танг СЦ, Собеи ЦГ, Таилор СМ, Арумугам ТВ. Патофизиологија, лечење и животињски и ћелијски модели исхемијског можданог удара код људи. Мол Неуродегенер. 2011;6(1):11. дои:10.1186/1750- 1326-6-11
6. Гонзалез-Родригуез ПЈ, Ксионг Ф, Ли И, Зхоу Ј, Зханг Л. Фетална хипоксија повећава вулнерабилност хипоксично-исхемијске повреде мозга код новорођених пацова: Улога глукокортикоидних рецептора. Неуробиол Дис. 2014;65:172–179. дои:10.1016/ј.нбд.2014.01.020
7. Родриго Р, Фернандез-Гајардо Р, Гутиеррез Р, ет ал. Оксидативни стрес и патофизиологија исхемијског можданог удара: нове терапеутске могућности. ЦНС Неурол Дисорд Друг Таргетс.2013;12(5):698–714. дои:10.2174/ 1871527311312050015
8. Зханг Ц, Линг ЦЛ, Панг Л, ет ал. Директна макромолекуларна испорука лека у подручје церебралне исхемије коришћењем наночестица посредованих неутрофилима. Тхераностицс. 2017;7(13):3260–3275. дои:10.7150/тхно.19979
9. Кахлес Т, Луедике П, Ендрес М, ет ал. НАДПХ оксидаза игра централну улогу у оштећењу крвно-мождане баријере у експерименталном можданом удару. Удар. 2007;38(11):3000–3006. дои:10.1161/строкеаха.107.489765
10. Цхен Х, Сонг ИС, Цхан ПХ. Инхибиција НАДПХ оксидазе је неуропротективна након исхемије-реперфузије. Ј Цереб Блоод Флов Метаб. 2009; 29(7):1262–1272. дои:10.1038/јцбфм.2009.47
11. Капоор М, Схарма Н, Сандхир Р, Нехру Б. Ефекат инхибитора НАДПХ оксидазе апоцинина на исхемијско-реперфузиону повреду хипокампуса у мозгу пацова. Биомед Пхармацотхер. 2018;97:458–472. дои:10.1016/ј. биопха.2017.10.123
12. Иу С, Ванг Ц, Цхенг К, ет ал. Активна компонента полипептида Ацхирантхес бидентата обезбеђује неуропротекцију кроз инхибицију апоптотичког пута зависног од митохондрија у култивисаним неуронима и на животињским моделима церебралне исхемије. ПЛоС Оне. 2014; 9(10):е109923. дои:10.1371/јоурнал.поне.0109923
13. Генг ХКС, Ли РП, Ли ИГ, ет ал. 14,15-ЕЕТ потискује апоптозу неурона у исхемијској реперфузији кроз митохондријски пут. Неуроцхем Рес.2017;42(10):2841–2849. дои:10.1007/с11064-017-2297-6
14. Ду К, Ли Л, Јерз Г. Пречишћавање астилбина и изоастилбина у екстракту ризома смилак глабра брзом противструјном хроматографијом. Ј Цхроматогр А. 2005;1077(1):98–101. дои:10.1016/ј.цхрома. 2005.04.072
15. Иу Х, Иуан Б, Цху К, Ванг Ц, Би Х. Заштитне улоге изоастилбина против Алцхајмерове болести путем Нрф2-посредоване антиоксидације и анти-апоптозе. Инт Ј Мол Мед.2019;43(3):1406–1416. дои:10.3892/ијмм. 2019.4058
16. Зхоу Кс, Ксу К, Ли ЈКС, Цхен Т. Структурна ревизија два флаванонол гликозида из Смилак глабра. Планта Мед. 2009;75(6):654–655. дои:10. 1055/с-0029-1185360
17. Моримото Ј, Иасухара Т, Камеда М, ет ал. Електрична стимулација побољшава миграциону способност трансплантираних стромалних ћелија коштане сржи у моделу исхемијског можданог удара глодара. Целл Пхисиол Биоцхем. 2018; 46(1):57–68. дои:10.1159/000488409
18. Торренс-Мас М, Понс ДГ, Састре-Серра Ј, Оливер Ј, Роца П. Утишавање СИРТ3 сензибилизира ћелије рака дојке на цитотоксичне третмане кроз повећање производње РОС. Ј Целл Биоцхем. 2017;118(2):397–406. дои:10.1002/јцб.25653
19. Нассир Ф, Арндт ЈЈ, Јохнсон СА, Ибдах ЈА. Регулација митохондријалног трифункционалног протеина модулира неалкохолну масну болест јетре код мишева. Ј Липид Рес. 2018;59(6):967–973. дои:10.1194/јлр.М080952
20. Торренс-Мас М, Хернандез-Лопез Р, Оливер Ј, Роца П, Састре-Серра Ј. Сиртуин 3 утишавање побољшава ефикасност оксалиплатина кроз ацетилацију МнСОД код рака дебелог црева. Ј Целл Пхисиол. 2018;233(8):6067–6076. дои:10.1002/јцп.26443
21. Хернандез-Хименез М, Хуртадо О, Цуартеро МИ, ет ал. Регулатор тихих информација 1 штити мозак од церебралног исхемијског оштећења. Удар. 2013;44(8):2333–2337. дои:10.1161/строкеаха.113.001715
22. Цхен ГИ, Нунез Г. Стерилна инфламација: сенсинг и реаговање на оштећење. Нат Рев Иммунол. 2010;10(12):826–837. дои:10.1038/нри2873
23. Елтзсцхиг ХК, Ецкле Т. Исхемија и реперфузија: Од механизма до превођења. Нат Мед. 2011;17(11):1391–1401. дои:10.1038/нм.2507
24. Дзиеџић Т. Системска инфламација као терапијски циљ у акутном исхемијском можданом удару. Екперт Рев Неуротхер.2015;15(5):523–531. дои:10.1586/ 14737175.2015.1035712
25. Иемисци М, Гурсои-Оздемир И, Вурал А, Цан А, Топалкара К, Далкара Т. Контракција перицита изазвана оксидативно-нитративним стресом отежава капиларни рефлов упркос успешном отварању оклудиране церебралне артерије. Нат Мед. 2009;15(9):1031–1037. дои:10.1038/нм.2022
26. Цхен Х, Иосхиока Х, Ким ГС, ет ал. Оксидативни стрес код исхемијског оштећења мозга: Механизми ћелијске смрти и потенцијалне молекуларне мете за неуропротекцију. Антиоксид Редок сигнал. 2011;14(8):1505–1517. дои:10.1089/арс.2010.3576
27. Олмез И, Озиурт Х. Реактивне врсте кисеоника и исхемијска цереброваскуларна болест. Неуроцхем Инт. 2012;60(2):208–212. дои:10.1016/ј. неуинт.2011.11.009
28. Гуо Ј, Цхенг Ц, Цхен ЦС, ет ал. Прекомерна експресија фибулина-5 ублажава исхемијску/реперфузиону повреду после оклузије средње церебралне артерије код пацова. Мол Неуробиол. 2016;53(5):3154–3167. дои:10.1007/с12035- 015-9222-2
29. Кианг М, Ксу И, Лу И, ет ал. Аутофлуоресценција МДА-модификованих протеина као ин витро и ин виво сонда у анализи оксидативног стреса. Протеин Целл. 2014;5(6):484–487. дои:10.1007/с13238-014-0052-1
30. Хоу С, Зхао ММ, Схен ПП, ет ал. Неуропротективни ефекат салвијанолне киселине против церебралне исхемије/реперфузијске повреде. Инт Ј Мол Сци. 2016;17(7). дои:10.3390/ијмс17071190
31. Адибхатла РМ, Хатцхер ЈФ. Оксидација и пероксидација липида у здрављу и болести ЦНС: од молекуларних механизама до терапијских могућности. Антиоксид Редок сигнал. 2010;12(1):125–169. дои:10.1089/ арс.2009.2668
32. Старон А, Макоса Г, Котер-Мицхалак М. Оксидативни стрес у еритроцитима код пацијената са реуматоидним артритисом. Рхеуматол Инт. 2012; 32(2):331–334. дои:10.1007/с00296-010-1611-2
33. Асцı С, Демирци С, Асцı Х, Догуц ДК, Онаран И. Неуропротективни ефекти прегабалина на церебралну исхемију и реперфузију. Балкан Мед Ј. 2016;33(2):221–227. дои:10.5152/балканмедј.2015.15742
34. Тао Т, Ли ЦЛ, Ианг ВЦ, ет ал. Заштитни ефекти пропофола против оштећења церебралне исхемије/реперфузије код пацова кроз инхибицију пута фактора који индукује апоптозу. Браин Рес.2016;1644: 9–14. дои:10.1016/ј.браинрес.2016.05.006
35. Мартиноу ЈЦ, Иоуле РЈ. Митохондрије у апоптози: чланови породице Бцл-2 и динамика митохондрија. Дев Целл. 2011;21(1):92–101. дои:10.1016/ј.девцел.2011.06.017
36. Борнер Ц, Андревс ДВ. Апоптотичне поре на митохондријима: Да ли се пробијамо или смо још увек заглављени? Целл Деатх Диффер. 2014;21(2):187–191. дои:10.1038/цдд.2013.169
37. Сиддикуи ВА, Ахад А, Ахсан Х. Мистерија породице БЦЛ2: Бцл-2 протеини и апоптоза. Ажурирање. Арцх Токицол. 2015;89(3):289–317. дои:10.1007/с00204-014-1448-7
38. Маес МЕ, Сцхламп ЦЛ, Ницкеллс РВ. БАКС до основа: Како породица гена БЦЛ2 контролише смрт ганглијских ћелија ретине. Прог Ретин Еие Рес. 2017;57:1–25. дои:10.1016/ј.претеиерес.2017.01.002
39. Ерфани С, Кхаксари М, Ориан С, Схамсаеи Н, Абоуталеб Н, Никбакхт Ф. Нампт/ПБЕФ/висфатин испољава неуропротективне ефекте против исхемијске/реперфузијске повреде путем модулације односа Бак/Бцл-2 и превенције каспазе{ {2}} активација. Ј Мол Неуросци. 2015;56(1):237–243. дои:10.1007/с12031-014-0486-1

40. Цхен Л, Цао Ј, Цао Д, ет ал. Заштитни ефекат дексмедетомидина

против церебралне исхемије/реперфузијске повреде погоршане дијабетичком хипергликемијом: студија ин виво и ин витро, Лифе Сди, 2019:235:116553.дои; 10.1016/илфс.2019116553

41. Зхао Х, Луо И, Цхен Л, ет ал. Сирт3 инхибира церебралну исхемију-реперфузију повреду кроз нормализацију Внт/-катенин пута и блокирање митохондријалне фисије. Целл Стрес Цхаперонес. 2018;23(5):1079–1092. дои:10.1007/с12192-018-0917-и

42. Зханг В, Веи Р, Зханг Л, Тан И, Киан Ц. Сиртуин 6 штити мозак од церебралне исхемије/реперфузијске повреде кроз активацију НРФ2. Неуросциенце.2017;366:95–104. дои:10.1016/ј.неуросциенце.2017.09.035